Dezvoltarea unei metode rapide bazate pe citometria în flux pentru testarea eficienței dezinfectanților față de bacterii izolate din infecții nosocomiale
Director proiect: Dr. Luminița-Gabriela Măruțescu
Codul proiectului: PN-III-P2-2.1-PED-2021-2115
Nr. contractului: PD 620
Titlul proiectului: Dezvoltarea unei metode rapide bazate pe citometria în flux pentru testarea eficienței dezinfectanților față de bacterii izolate din infecții nosocomiale
Acronim: FAST-DET
Durata: 24 luni
Valoarea totală a Contractului: 600,000 RON
Data începerii contractului: 21/06/2022
Data încheierii contractului: 21/06/2024
Abstract
Infecţiile asociate asistenţei medicale (IAAM) sunt o problemă prioritară de sănătate publică la nivel global, generând rate ridicate de morbiditate și mortalitate, adesea ca urmare a emergenţei rezistenței la antibiotice (RA) și o povară economico-socială. Rezistența la dezinfectanți și co-/cross-selecția pentru RA sunt provocări cheie pentru gestionarea IAAM. Proiectul își propune să depășească limitările metodologiilor tradiționale, bazate pe cultivare, pentru testarea eficacității dezinfectanților în condițiile utilizării practice a acestora, prin dezvoltarea și validarea unei metode pe bază de citometrie în flux (CF). CF va permite evaluarea rapidă și precisă a eficienției dezinfectanților, prin cuantificarea bacteriilor vii, moarte și viabile dar ne-cultivabile. Prin furnizarea unor rezultate mai rapide privind eficiența dezinfectantului împotriva agenților patogeni nosocomiali rezistenți la antibiotice, CF va asigura un răspuns precoce și selectarea unui dezinfectant eficient, contribuind astfel la prevenirea contaminării încrucișate și a răspândirii IAAM și la reducerea presiunii selective pentru dezvoltarea RA. Pentru atingerea acestui scop au fost propuse următoarele obiective specifice: O1. Elaborarea și optimizarea protocolului experimental de FC pentru testarea eficienței dezinfectanților. O2. Validarea metodei CF față de metodele standard CEN. Vom investiga dacă celulele bacteriene supuse acțiunii dezinfectanților sunt omorâte, își păstrează capacitatea de creștere și multiplicare sau intră în stare viabilă, dar ne-cultivabilă. Prin evidențierea prezenței acestor populații microbiene pe o suprafață, metoda dezvoltată ar putea contribui la investigarea, controlul și limitarea încărcăturii bacteriene în mediu, și indirect, a potențialului lor de răspândire și de a produce infecții nosocomiale, permițând astfel implementarea unor măsuri mai rapide și mai eficiente (răspuns precoce, reducerea mortalității și a costurilor asociate).
Obiectivul proiectului
Proiectul își propune să depășească limitările metodologiilor tradiționale, bazate pe cultivare, pentru testarea eficacității dezinfectanților în condițiile utilizării practice a acestora, prin dezvoltarea și validarea unei metode pe bază de citometrie în flux (CF). CF va permite evaluarea rapidă și precisă a eficienției dezinfectanților, prin cuantificarea bacteriilor vii, moarte și viabile dar ne-cultivabile. Prin furnizarea unor rezultate mai rapide privind eficiența dezinfectantului împotriva agenților patogeni nosocomiali rezistenți la antibiotice, CF va asigura un răspuns precoce și selectarea unui dezinfectant eficient, contribuind astfel la prevenirea contaminării încrucișate și a răspândirii IAAM și la reducerea presiunii selective pentru dezvoltarea RA.
Pentru atingerea acestui scop au fost propuse următoarele obiective specifice:
O1. Elaborarea și optimizarea protocolului experimental de FC pentru testarea eficienței dezinfectanților.
O2. Validarea metodei CF față de metodele standard CEN.
Rezultate estimate
Proiectul FAST-DET va oferi o metodă rapidă și precisă de evaluare a eficienței dezinfectanților împotriva agenților patogeni nosocomiali. În plus, metoda FCM va putea oferi informații despre populațiile de celule bacteriene lezate. Vom investiga dacă celulele afectate își păstrează viabilitatea și cresc în anumite condiții de mediu sau rămân necultivabile. În acest fel, prin evidențierea prezenței unor astfel de populații bacteriene pe suprafețe, metoda bazată pe citometrie în flux va permite investigarea, controlul și limitarea încărcăturii microbiene, cu potențial de diseminare și de producere a infecțiilor nosocomiale, permițând implementarea de măsuri mai rapide și mai eficiente (reducerea timpului de răspuns și/sau reducerea numărului de decese). Rezultatele obţinute vor face obiectul unei teze de doctorat; datele vor fi descrise și în lucrări științifice (cel puțin 4 articole ISI), o cerere de brevet.

The working principle of the CEN standard methods and the FCM method for disinfectant efficacy testing.

Rezumat_PED620_2022_etapa1
Rezumat_PED620_etapa_2
Raport științific și tehnic – rezumat etapa III
Prezentarea succintă a rezultatelor proiectului
Diseminarea rezultatelor proiectului
